超微量分光光度計(jì)的原理、構(gòu)造和使用方法
更新時(shí)間:2023-07-17 | 點(diǎn)擊率:1411
超微量分光光度計(jì)是一種高靈敏度的儀器,用于測(cè)量非常微弱的光信號(hào)。它在生物、化學(xué)、環(huán)境等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。本文將介紹它的原理、構(gòu)造和使用方法。
1、原理基于比爾-朗伯定律,即光通過(guò)溶液時(shí),吸收和透射的光強(qiáng)與溶液中物質(zhì)的濃度成正比。根據(jù)這一原理,光度計(jì)通過(guò)測(cè)量樣品和參比物之間的光強(qiáng)差異來(lái)確定樣品中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。
2、構(gòu)造主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。光源通常采用氘燈或鎢燈,其發(fā)出的光經(jīng)過(guò)單色器進(jìn)行波長(zhǎng)選擇,以確保只有特定波長(zhǎng)的光通過(guò)樣品。樣品室是放置待測(cè)樣品的區(qū)域,通常使用石英或玻璃制成,以確保光線的透過(guò)性。檢測(cè)器可以是光電二極管或光電倍增管,用于轉(zhuǎn)換光信號(hào)為電信號(hào),并傳輸給數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行分析和計(jì)算。
3、使用超微量分光光度計(jì)時(shí),首先需要校準(zhǔn)儀器。校準(zhǔn)過(guò)程涉及使用已知濃度的參比物質(zhì)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,以便后續(xù)測(cè)量中進(jìn)行定量分析。接下來(lái),將待測(cè)樣品放入樣品室,并選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)。啟動(dòng)儀器后,通過(guò)檢測(cè)器收集樣品和參比物之間的光強(qiáng)差異。數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)會(huì)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或預(yù)設(shè)的算法計(jì)算出目標(biāo)物質(zhì)的濃度并顯示結(jié)果。
4、該光度計(jì)具有高靈敏度、高分辨率和廣泛的線性范圍等優(yōu)點(diǎn)。它可以測(cè)量微量的物質(zhì)濃度,通常在納摩爾至微摩爾的級(jí)別。因此,它在生物學(xué)研究中常用于蛋白質(zhì)、核酸和酶的定量檢測(cè),也被廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)和藥物分析等領(lǐng)域。
總結(jié)而言,超微量分光光度計(jì)能夠測(cè)量極小的光信號(hào)并定量分析樣品中的目標(biāo)物質(zhì)濃度。它在科學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用中發(fā)揮著重要的作用,為研究人員提供了一種快速、準(zhǔn)確和可靠的分析手段。